Análise de Status Mutacional do Gene IGHV

A Cadeia pesada dos genes das Igs (IGH) e amplificada para analise de clonalidade por PCR Single-PLEX em DNA para IGHV-LLC. Para analise do rearranjo V(D)J seis reacoes de PCR sao realizadas cada com primers familia-especificos (VH1/7-VH6) e, J H _ consensus. A monoclonalidade e confirmada pela presenca do padrao de bandas encontrado. Produtos amplificados sao purificados e sequenciados. A sequencia VH e a regiao juncional sao submetidas aos bancos de dados IMGT/VQuest e IgBlast para determinacao da porcentagem de mutacao. Uma homologia de 98% e utilizada como corte para discriminar casos mutados de nao mutados.

Para que serve este exame?

Estratificação de risco para pacientes com leucemia mieloide aguda (LMA) com t(8;21) ou inv16.

Pedido médico

• Informar os medicamentos em uso.
• Não é necessário jejum
• Obrigatória apresentação do pedido médico, preenchimento do questionário e assinatura do termo de consentimento. Altamente recomendado que o pedido médico apresente um breve relatório/ história clínica sobre a suspeita diagnóstica, pois isto é essencial para análise e interpretação do exame.

• Sangue

O DNA é extraído da amostra biológica. É realizada uma PCR para o gene requisitado (ou região de um gene) e o produto é preparado para posterior sequenciamento de Sanger, em um sequenciador automático. A numeração do transcrito é feita a partir da base A do códon de iniciação ATG. As variantes foram classificadas e interpretadas de acordo com o quadro clínico relatado na solicitação médica.