Análise de Status Mutacional do Gene IGHV

A Cadeia pesada dos genes das Igs (IGH) é amplificada para análise de clonalidade por PCR Single-PLEX em DNA para IGHV-LLC. Para análise do rearranjo V(D)J seis reações de PCR são realizadas cada com primers família-específicos (VH1/7-VH6) e, J H _ consensus. A monoclonalidade e confirmada pela presença do padrão de bandas encontrado. Produtos amplificados são purificados e sequenciados. A sequencia VH e a região juncional são submetidas aos bancos de dados IMGT/VQuest e IgBlast para determinação da porcentagem de mutação. Uma homologia de 98% e utilizada como corte para discriminar casos mutados de não mutados.

Para que serve este exame?

Este exame está indicado para estratificação de risco e prognóstico na Leucemia Linfocítica Crônica (LLC).

Pedido médico

• Informar os medicamentos em uso.
• Não é necessário jejum
• Obrigatória apresentação do pedido médico, preenchimento do questionário e assinatura do termo de consentimento. Altamente recomendado que o pedido médico apresente um breve relatório/ história clínica sobre a suspeita diagnóstica, pois isto é essencial para análise e interpretação do exame.

• Sangue

O DNA é extraído da amostra biológica. É realizada uma PCR para o gene requisitado (ou região de um gene) e o produto é preparado para posterior sequenciamento de Sanger, em um sequenciador automático. A numeração do transcrito é feita a partir da base A do códon de iniciação ATG. As variantes foram classificadas e interpretadas de acordo com o quadro clínico relatado na solicitação médica.